作业帮microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计?茎环引物设计时是单链序列,发这个序列给公司合成后,做实验时会自动成环吗?不需要特殊说明或加工,直接把这个单链序列发给公司就行吧?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/10 12:16:19
microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计?茎环引物设计时是单链序列,发这个序列给公司合成后,做实验时会自动成环吗?不需要特殊说明或加工,直接把这个单链序列发给公司就行吧?
microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计?
茎环引物设计时是单链序列,发这个序列给公司合成后,做实验时会自动成环吗?不需要特殊说明或加工,直接把这个单链序列发给公司就行吧?还有我看到一篇文献上,接下来PCR的上游引物除了包含microRNA的部分序列外,还在前面加了几个碱基,这个依据到底是什么呢?具体怎样设计这个上游引物呢?
microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计?茎环引物设计时是单链序列,发这个序列给公司合成后,做实验时会自动成环吗?不需要特殊说明或加工,直接把这个单链序列发给公司就行吧?
合成的单链在实验时又一个和模板结合的退火过程,在这个过程中会自动形成茎环结构,如果你的茎环结构设计合理的话.
我也在类似文献上看到过上游引物含有额外的碱基,上面有说明的,是为了调整Tm值.
上游引物不能全覆盖miRNA,5‘-增加几个碱基后Tm值和下游引物相对应,可以再用软件检查,避免非特异性结合
一般自己设计这种miRNA的RT-PCR引物需要不断优化,一次成功的机会较小,要做好心理准备.可以选择试剂盒
茎环引物直接发序列给公司合成就好了，不用加说明或加工。上游引物加几个碱基可以延长扩增出来的产物的长度，一般PCR扩增目的片段不都有长度限制吗，太长太短都不好。依据应该都是参考文献的。上游引物的设计就是microRNA 5·端的一段序列。
microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分
microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计?茎环引物设计时是单链序列,发这个序列给公司合成后,做实验时会自动成环吗?不需要特殊说明或加工,直接把这个单链序列发给公司就行吧?
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