PCR和RT-PCR体系只有聚合酶的区别吗,缓冲液中第一链缓冲液是什么成分,做什么的.

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/03 07:19:48

PCR和RT-PCR体系只有聚合酶的区别吗,缓冲液中第一链缓冲液是什么成分,做什么的.
PCR和RT-PCR体系只有聚合酶的区别吗,缓冲液中第一链缓冲液是什么成分,做什么的.

PCR和RT-PCR体系只有聚合酶的区别吗,缓冲液中第一链缓冲液是什么成分,做什么的.
1.酶不同：
PCR中,聚合酶是以DNA为模板的DNA聚合酶.
RT-PCR中,逆转录酶是以RNA为模板的DNA聚合酶.
2.缓冲体系不同：
由于聚合酶不同,两者相应的反应buffer （RB）也略有不同.因为PCR有级联放大效应,buffer成分可能更复杂,以保证能减少非特异扩增.
例如：10 × Taq 缓冲液成分：
500 mM KCl,100 mM Tris HCl (pH 9.0 at 25° ),15 mM MgCl2,and 1% Triton X-100.
而RT-PCR主要靠逆转录酶的耐热性提高特异性,所以RB相对简单点：
250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25°C),375 mM KCl,15 mM MgCl2,50 mM DTT.
3.模板不同：
DNA模板和RNA模板的区别
4.引物不同
PCR,一对特异引物
RT-PCR,一个特异引物+通用引物/随机引物
5.其他
RT-PCR中需要添加RNase抑制剂
实在想不起来其他不同了.

RT-PCR目前有两种，一种是利用SYBE-GREEN染料，另一种利用探针。利用SYBE-GREEN作燃料的，其体系需要SYBE-GREEN，另一种就是需要探针，所以区别不是在聚合酶，而是在检测染料这里！

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