real pcr

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/26 15:43:03
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楼上的不懂不要装懂,胡说八道.
上下游引物各自应该落在两个外显子上,这样就是跨过了一个内含子,可以避免基因组的干扰.

我们知道真核生物DNA中，外显子和内含子交叉分部（外显子始终比内含子多一个），DNA的翻译只能翻译外显子，因此翻译完一段外显子后，引物需要跨内含子才能继续翻译。

比如说两个外显子中间是隔着一个内含子的，你要在这两个外显子的这段序列上设计引物的话，最好设计的引物扩增片段包含这两个外显子，即跨内含子（内含子在这两个外显子中间）。这种设计方法的优点是可以避免非特异扩增

上下游引物各自应该在不同外显子上，可以跨一个或者多个内含子，但是产物必须满足realtime的长度要求。这样可以避免基因组DNA的影响，如果实在找不到好引物或者实在倒霉就一个外显子的，RT之前需要先用DNA酶处理一下，务必把基因组的影响消除掉。...

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上下游引物各自应该在不同外显子上，可以跨一个或者多个内含子，但是产物必须满足realtime的长度要求。这样可以避免基因组DNA的影响，如果实在找不到好引物或者实在倒霉就一个外显子的，RT之前需要先用DNA酶处理一下，务必把基因组的影响消除掉。

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