目的基因的定位是什么意思 能不能用运载体来完成

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 20:18:10
目的基因的定位是什么意思 能不能用运载体来完成

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目的基因的定位是什么意思 能不能用运载体来完成
一、目的基因的定义:把需要研究的基因称为目的基因.(一般把需要分析的基因称靶基因,在基因克隆过程中有时两者均称为插入基因,有时三者含义相近.)
二、目的基因的制备:
(一)从细胞核中直接分离
简单的原核生物目的基因可从细胞核中直接分离得到,但人类的基因分布在23对染色体上,较难从直接法中得到.
(二)染色体DNA的限制性内切酶酶解
II型限制性内切酶可专一性地识别并切割特定的DNA顺序,产生不同类型的DNA末端.若载体DNA与插入的DNA片段用同一种内切酶消化,或靶DNA与载体DNA末端具有互补的粘性末端,可以直接进行连接.
(三)人工体外合成
简短的目的基因可在了解DNA一级结构或多肽链一级结构氨基酸编码的核苷酸序列的基础上人工合成.
(四)用逆转录酶制备cDNA
大多数的目的基因是由mRNA合成cDNA(反转录DNA)得到.从RNA入手,先从细胞提取总RNA,然后根据大多数真核mRNA含有多聚腺嘌呤(polyadenylic acid ,polyA)尾的特点,用寡聚dT纤维素柱将mRNA分离出,以mRNA为模板,在多聚A尾上结合12-18个dT的寡聚dT片段,作为合适的起始引物,在逆转录酶作用下合成第一条 图10-39 目的基因的制备cDNA链.用碱或RNA酶水解除去mRNA,再用DNA聚合酶,最好是Klenow片段合成第二条DNA链.双链合成后,用S1核酸酶切去发夹结构,即可获得双链cDNA.cDNA用于探针制备、序列分析、基因表达等研究.

目的基因的定位是什么意思 能不能用运载体来完成 目的基因的定位是什么意思 能不能用运载体来完成 运载目的基因的运载体有哪些 目的基因的定位是什么意思?具体的, 基因工程 运载体为什么要有运载体?目的基因不可以单独导入受体细胞吗? 基因工程的目的基因是什么目的基因与运载体结合的目的又是什么? 目的基因能合成银光蛋白,可选用无标记基因的质粒作为运载体吗 在基因工程操作中,运载体的本质是双链DNA分子,下列功能不能由运载体完成的是A.目的基因的转运 B.目的基因的扩增 C.目的基因的表达 D.目的基因的定位为什么选D?D具体指什么?C也不是 在基因工程操作中,运载体的本质是双链DNA分子.下列功能不需要运载体就能完成的是?DA.目的基因的转运 B.目的基因的扩增C.目的基因的表达 D.目的基因的定位麻烦具体解释一下原因,为什么扩 如何筛选具有目的基因的运载体,是运载体,不是受体细胞. 目的基因和运载体结合 人工合成的目的基因如何与运载体结合人工合成的基因没有黏性末端,如何与运载体结合? 为什么植物细胞的诱导融合不能用灭活的病毒,动物细胞却可以用不同的限制酶切割目的基因和运载体,能切出相同的黏性末端吗? 不属于质粒被选为目的基因运载体的理由是A.能复制B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA我也选D,但是答案选C 目的基因若能编码绿色荧光蛋白,那么可以选择无标记基因的质粒作为运载体.这句话对吗?如上…… 用同一种限制酶切割目的基因与运载体时,如果切割时 运载体中 没有和目的基因相同的片段怎么办啊? 为什么用两种不同的限制酶切目的基因和运载体,就能防止运载体本身、基因本身连起来?我们老师说是因为DNA有极性,但是我画了个图,还是拼起来了 噬菌体可以作为标记基因的运载体RT,是不是因为不是“标记基因”,而应该是“目的基因”?